多因素疾病“犬窝咳”

      “传染性犬喉气管炎”或称“犬窝咳”，是一种非常常见的呼吸道疾病，其特点为急性发作的剧烈咳嗽，有时可见痉挛性咳嗽。首先应该怀疑为一种多因素疾病，涉及病毒和细菌性病原体。易感因素为饲养密度高的场所，例如收容所、犬舍或大型育种机构。在犬训练学校或退役工作犬的饲养场所也有很高的感染风险。任何年龄均可感染，6周龄至6月龄犬最常见，症状也最严重。 

      引起该病的病原体中，排在第一位的是病毒，如犬腺病毒2型（CAV-2）和犬副流感病毒（CPiV）。而感染犬传染性肝炎（HCC）的病原，犬腺病毒1型（CAV-1）可引起中度呼吸道症状。较少见的病原有犬流感病毒、犬瘟热病毒（CDV）和犬疱疹病毒（CHV）。最主要的细菌性病原体为支气管败血性博氏杆菌。上述病原体损伤呼吸道上皮细胞后，继发性细菌或支原体感染会导致更为严重的呼吸道疾病。继发性感染的病原体包括假单胞菌属、大肠杆菌、克雷伯菌、巴氏杆菌和链球菌。

       在不复杂的病例中，仅见干咳或者痉挛咳的症状，可通过人工诱咳引发。气管也易受刺激诱发症状。更严重的病例中可出现厌食、排痰性湿咳、嗜睡、呼吸困难、呼吸急促和/或虚弱。如出现发热，多为中等程度发热。通过病史（突发症状、可能接触病原[接触过其他犬]、缺乏免疫等）结合临床症状可以确诊。病毒性病原体，尤其是在疾病早期，可以使用鼻拭子或咽喉拭子样本通过PCR检测检出。由于细菌性感染通常导致更严重的症状，进行细菌培养和后续的抗菌谱检测等细菌学检查是十分重要的。用于培养的样本需要咽喉深部拭子或气管、支气管肺泡灌洗（BAL）样本。样本必须在未使用任何抗生素时进行。

图1: RT-PCR荧光曲线：通过上升的曲线，可以判断样本中含有病原体。

      因为这些病原体在犬群中大量存在，抗体检测不是总有意义，且不能区分抗体是因疫苗免疫产生还是因感染产生。因此在大多数病例中，需要在感染2-3周后进行第二次抗体滴度检测，以获知目前的感染病原。

      大多数病例需根据药敏试验得到的抗菌谱进行至少14天抗生素治疗。止咳药（如布托啡诺）仅用于干咳。重要的是要严格休息至少2-3周；在严重病例中甚至更长。应该告知动物主人他们的犬是有传染性的，应该与其他犬只隔离。尤其是博氏杆菌感染的犬，因为在病愈后，细菌在呼吸道中仍可存在几个月。为预防疾病，市面上有几种疫苗可供使用。

犬副流感病毒 (CPiV)

      CPiV是一种属于副黏病毒科的大型囊膜RNA病毒。该种病毒不能在巨噬细胞中复制，因此只存在于上呼吸道。单独感染症状不明显，但是可出现呼吸道症状，如流涕或咳嗽。

      病毒主要在感染早期（感染后6-8日）通过口鼻分泌物排出。可通过PCR检测检出。

犬腺病毒 (CAV)

      CAV是一种无囊膜的DNA病毒，有相对高的抵抗力。腺病毒有严格的种属特异性。CAV-1和CAV-2的遗传性与抗原性相近；它们的抗体具有交叉保护性。二者的不同之处在于嗜器官性不同。CAV-2对呼吸道具有亲和力：该病毒在纤毛上皮中复制。与CAV-1相反，CAV-2不发生广泛性感染。临床症状通常较轻。

      CAV-2在感染后约9日，通过鼻分泌物排出。可通过空气和直接接触感染。可通过PCR检测检出。

犬瘟热病毒 (CDV)

      犬瘟热病毒 (CDV)是具有高度传染性的RNA病毒，可感染食肉目的多种动物。 除了犬，还可以感染狐狸、貂、浣熊、水獭和其他动物。该病毒可导致急、慢性全身性疾病，根据动物的免疫状态不同而表现出不同的症状。

•  胃肠道症状：腹泻、呕吐
•  呼吸系统症状：结膜炎、咳嗽、支气管炎至卡他性支气管肺炎。
• 中枢神经系统症状：失明、共济失调、行为改变、强直性阵挛
•  皮肤症状：爪垫与鼻部的过度角化
  

      临床隐性感染的动物可成为病毒库。通过直接接触或空气进行传染。最初的病毒复制发生在局部淋巴结或扁桃体的单核细胞内，由此发展至细胞相关的病毒血症和靶器官的感染。 

       6月龄以上的幼犬最易患病。典型症状为间歇性发热。病毒可在感染后5日通过各种分泌物排出。可通过PCR检测进行直接诊断。

犬疱疹病毒 (CHV)

      幼犬的犬疱疹病毒(CHV)感染是非常严重的疾病；子宫内感染可导致流产，但是成年动物大多为隐性感染，如有症状，则仅表现出轻微的呼吸系统症状，如鼻炎和结膜炎。

      疱疹病毒是一类大型的囊膜DNA病毒，具有较高的种属特异性。典型的疱疹病毒感染为终身潜伏性感染。在潜伏期时，病毒位于感觉神经节的神经元内。潜伏性感染可因应激或免疫抑制（例如使用糖皮质激素）而激活，排出CHV，在口鼻及阴道分泌物中可发现病毒。

       大多数动物通过直接接触感染动物的带毒口鼻分泌物感染，以及子宫内感染。此后，病毒在上呼吸道黏膜和扁桃体内复制。病毒复制的最适温度为37℃。因此，幼犬体温降低后，会出现病毒血症，随后内脏器官发生出血坏死性感染。稍年长一点的幼犬体温调节能力发育完全，感染将被限制在上呼吸道。病毒在活跃期可用鼻拭子或咽喉拭子通过PCR检测检出。在尸体剖检时取肝组织或流产母犬的子宫拭子进行PCR检测也可检出。

支气管败血性杆菌

       支气管败血性博氏杆菌是一种可运动的小型需氧革兰氏阴性菌。

图2: 支气管败血性博氏杆菌 –选择性培养基单培养

      支气管败血性博氏杆菌对呼吸道纤毛上皮亲和力强，产生的毒素可使纤毛麻痹，抑制纤毛的清除功能，减弱吞噬作用。这就是除了支气管败血性博氏杆菌本身的致病性以外，在促进继发细菌感染过程中起到重要作用的原因。该细菌为多宿主寄生(动物共患病)，能够由犬传染给猫和异宠，反之亦然。

      可通过飞沫和近距离接触传染。潜伏期为2-14天。临床症状主要为咳嗽、浆液性鼻部或眼部分泌物，其他表现正常。 

      支气管败血性博氏杆菌可导致强烈的局部免疫反应，但是作为兼性胞内寄生菌，该菌可逃避特异性免疫反应，长时间持续存在于呼吸道内。感染支气管败血性博氏杆菌的犬至少需要6个月后才能具有免疫力。

      主要通过PCR检测对支气管败血性博氏杆菌进行检测，检测方法的敏感性极高。为了获得准确的治疗方案，推荐进行细菌分离培养并检测抗菌谱，因为有报道称支气管败血性博氏杆菌对强力霉素和四环素具有耐药性。需要在症状消失后至少再持续用药一周。可用活疫苗滴鼻进行免疫。在接种疫苗后细菌在呼吸道内存活数月，并产生局部免疫。因此在使用抗生素时进行疫苗接种是无效的。

支原体属

      支原体是非常小的微生物，没有细胞壁，可通过有丝分裂进行复制增殖。支原体通过直接接触宿主细胞完成功能性代谢。因此在运输和培养过程中都需要特殊的培养基，在实验室培养时，支原体的生长也远慢于细菌。支原体通常致病性不强，但是另一方面逃避被感染动物免疫反应的能力很强。通常是在其他疾病过程中发生继发性感染。致病性支原体表现出宿主特异性。

      支原体共生体可见于犬的鼻咽部粘膜层，但是正常情况下不存在于下呼吸道。在下呼吸道，支原体可以造成纤毛停滞、纤毛减少，如果下呼吸道之前已经被病毒等因素破坏，甚至还可导致化脓性支气管肺炎。特别是犬支原体，可在犬呼吸道疾病患中发现。

      进行诊断的样本应该来源于下呼吸道。可使用支气管肺泡灌洗样本或干拭子通过PCR检测检出支原体。

      由于细胞壁缺失，只有针对蛋白或核酸合成的抗生素才对支原体有效，例如回旋酶抑制剂、大环内酯类或四环素类抗生素。需要注意的是，必须持续用药4-6周。

马链球菌兽疫亚种

      在过去的几年中，关于犬急性出血性肺炎病例的报道越来越多。被感染的犬通常是大群饲养（如犬舍、收容所）。发现致病性病原体是马链球菌兽疫亚种。一些病例是与前述病毒的合并感染，也可能是病毒感染后才继发的细菌感染。

      最初，犬只表现出流涕和湿咳，但是之后就开始呼吸急促、厌食和发热。有时甚至因为出血性胸膜积液而出现严重的呼吸困难，在开始出现临床症状两天内死亡；如果不及时治疗，死亡率很高。确切的发病机理尚不清楚。 

      分离培养和PCR检测所用的最佳样本是气管或支气管肺泡灌洗（BAL）样本或死亡动物的肺脏组织。因为马链球菌兽疫亚种的细菌能够通过呼吸道分泌物排出，因此鼻拭子或咽喉拭子也可用于PCR检测。为了避免传染，所有患病动物都需要进行隔离。 该病需要尽快进行治疗。可选用头孢菌素、β-内酰胺类或大环内酯类抗生素，预后谨慎。

      除了此前提到的病原体，许多真菌或寄生虫感染偶尔也可引起犬呼吸道疾病。

总结

为了确诊引起咳嗽的犬感染性疾病，特别是接触其他犬的幼犬，需要进行以下实验室检测：

• PCR检测：在检测病毒时尤为重要，也可以用于检测许多病原菌。需要注意的是，进行PCR检测之后无法进行药敏试验。 
  

          可用样本：气管或支气管肺泡灌洗样本，空白拭子（不带培养基）或个别病例中的组织样本。

•  细菌分离培养：进行细菌分离培养和药敏试验以确定正确的治疗方案。在支气管肺泡灌洗（BAL）样本中发现的任何病原体通常都有临床意义。 
  

          可用样本：气管或支气管肺泡灌洗样本，拭子（带转运培养基）。